《午夜性运行》是一部讲述乔丹和泰德两兄弟的故事。23年前，年幼的乔丹和泰德曾无意中用爆竹玩闹，不幸导致了杰夫的小JJ受伤。这一事件成为了乔丹、泰德和杰夫之间的秘密，伴随着岁月的流逝，他们各自走上了不同的生活道路多年后，乔丹和泰德成年成熟，他们有了各自的家庭和事业。然而，一个突如其来的事件打破了平静的生活。杰夫复仇心切，绑架了乔丹和泰德的父亲，并且发出了威胁：如果在24小时内不与10个女性发生关系，他们的父亲就会丧命。面对这样的恶劣处境，乔丹和泰德陷入了沉重的考虑。他们深爱着自己的父亲，不想失去他，但同时也感到无法接受这样道德败坏的要求。他们不愿意通过违背道德原则来救父，但又不忍见他死去。